表觀(guān)遺傳學(xué)研究中，在分子層面研究蛋白質(zhì)與DNA之間的相互作用有助于我們更深入的理解特定細胞功能和疾病發(fā)病機制。CST為了幫助科研人員更快的獲得可靠的實(shí)驗結果，進(jìn)一步擴大了蛋白質(zhì)-DNA互作研究產(chǎn)品組合，重磅推出了完整的CUT&Tag（Cleavage Under Targets and Tagmentation）解決方案，包括CUT&Tag試劑盒（#77552）、 建庫試劑盒（#47415）、抗體和適用于細胞以及組織的實(shí)驗步驟說(shuō)明書(shū)。

CUT&Tag實(shí)驗步驟

對于CST CUT&Tag實(shí)驗，首先將細胞與刀豆蛋白A包被的磁珠混合。洋地黃皂苷的透化處理可以讓靶標特異性的一抗進(jìn)入細胞并結合目的蛋白。由于需要將信號放大，因此還要添加二抗。隨后進(jìn)行預裝接頭的高活性CUT&Tag pAG-Tn5 (Loaded) （#79561）融合轉座酶的孵育，轉座酶進(jìn)入細胞后可以通過(guò)pAG結構域與二抗結合，這樣就使轉座酶與靶標蛋白間接聯(lián)系起來(lái)。加入Mg2+激活轉座酶活性后，目標基因組 DNA 會(huì )被切割并就地連接接頭 DNA，最后進(jìn)行DNA純化和PCR擴增。由于省去了體外接頭連接步驟，CUT&Tag可以節省您寶貴的時(shí)間，讓您在更短的時(shí)間內進(jìn)行蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究。

圖1：CUT&Tag 實(shí)驗原理

CUT&Tag為何與眾不同？

雖然ChIP仍然是研究蛋白質(zhì)-DNA相互作用的主要方法，但隨著(zhù)新的研究工具的出現，例如CUT&RUN以及CUT&Tag，傳統ChIP-Seq實(shí)驗需要大量樣品，重復性差、高背景等問(wèn)題得到了解決。CST CUT&Tag試劑盒（#77552）經(jīng)過(guò)了嚴格驗證，適用于細胞和組織樣品中多種靶標類(lèi)型，并包含了陽(yáng)性對照抗體Tri-Mmethyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751和陰性對照抗體Normal Rabbit IgG #2729 / Normal Mouse IgG #68860，以及抗兔和抗鼠的二抗。同時(shí)，當樣品量不足時(shí)，該試劑盒還可以幫助您更快獲得實(shí)驗結果，節省測序成本，并使單細胞染色質(zhì)分析成為可能。

圖2：CUT&Tag優(yōu)勢

此外，CST還專(zhuān)門(mén)針對CUT&Tag驗證了多種一抗，包括組蛋白靶標和部分非組蛋白靶標，以確保實(shí)驗結果的可重復性和可靠性。

CUT&Tag 試劑為您提供高質(zhì)量數據

一、組蛋白修飾分析

1、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對HCT 116細胞進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗。
 

2、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對低細胞數量的NCCIT細胞進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗。

二、轉錄因子和輔因子分析

1、使用Nanog (D2A3) XP Rabbit mAb (Mouse Specific) #8822對F9細胞進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗。

2、使用  JARID2  (D6M9X)  Rabbit  mAb  #13594  對NCCIT細胞進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗。

3、使用ATF-4 (D4B8) Rabbit mAb #11815對低細胞數量的Hep G2細胞進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗。

三、組織樣品分析
1、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對小鼠腦組織進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗。

2、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對小鼠肝組織進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗。

3、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對小鼠心臟組織進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗。

CST經(jīng)過(guò)嚴格驗證的一站式CUT&Tag解決方案現已全面上線(xiàn)：CUT&Tag試劑盒（#77552） + 一抗和二抗 + 建庫試劑盒（#47415）

CUT&Tag試劑盒和試劑

部分CUT&Tag驗證抗體列表

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